2.5戊二醛加多少固定（戊二醛1500怎么配）
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生物石蜡切片,固定液选取的问题啊~
做石蜡切片目前用的比较多的是4%的多聚甲醛或者10%的甲醛固定，做HE，IHC-P效果都是比较好的。
在制作小鼠肾组织石蜡切片进行免疫组化染色时，可以先固定再取材。一般常用的固定剂有甲醛、乙醇、丙酮等。以下是注意事项： 固定时间：固定的时间一般在1-2小时左右，不宜过长。固定时间过长会导致组织硬化，影响后续的制片过程。
选择适当的固定液：常用的固定液有福尔马林、乙醛等，根据需要选择合适的固定液。 固定时间：不同组织类型和大小需要不同的固定时间，一般为24-48小时。 标本处理：固定后的组织标本需要进行脱水、透明化和浸渍等处理，以便于后续的包埋和切片。
将上步二甲苯与石蜡的混合液倒出，不要倒掉材料，将烧杯中加入纯石蜡，共5-24h。纯石蜡需要更换三次。
固定组织后，需进行洗涤和脱水处理，以去除多余的固定液。接下来是透明步骤，使组织变得透明，便于后续处理。浸蜡与包埋是将透明后的组织放入石蜡中，形成蜡块，便于切片。切片过程需注意切片刀的锐利度和蜡块硬度，通常切片厚度在4～7微米。切片完成后，需贴片和烤片，以固定切片。
观察扫描电镜细胞冷冻干燥需要用乙酸异戊酯吗
1、将样品分别在 20℃、40℃和80℃冷冻 12 h，于冷冻干燥仪中干燥 12 h，备用。乙酸异戊酯的目的是置换掉乙醇，该药品神经毒，请在通风橱进行。
2、对于体积较大的样品，固定时间应适当延长，也可以采用冷冻固定。脱水是扫描电镜观察前的必要步骤。样品会逐步用酒精或丙酮进行脱水，然后进入醋酸异戊酯等中间液体。为了防止在真空环境中水分汽化造成的干扰，必须确保样品完全干燥。干燥方法包括空气干燥、临界点干燥和冷冻干燥。
3、透射电子显微镜在材料科学、生物学上应用较多。由于电子易散射或被物体吸收，故穿透力低，样品的密度、厚度等都会影响到最后的成像质量，必须制备更薄的超薄切片，通常为50～100nm。所以用透射电子显微镜观察时的样品需要处理得很薄。常用的方法有：超薄切片法、冷冻超薄切片法、冷冻蚀刻法、冷冻断裂法等。
用扫描电镜照污泥中的微生物,如何去掉杂质,如何进行
1、样品在5%的戊二醛溶液中固定过夜，以备后续处理。 固定后，用0.1M，pH0的磷酸缓冲液漂洗样品三次，每次15分钟，以去除残留的固定液。 接着，用1%的锇酸溶液固定样品1-2小时，以进一步固定样品中的微生物。
2.5%戊二醛和4%多聚甲醛固定液比例
1、%戊二醛和4%多聚甲醛固定液要4%多聚甲醛+（0.5-2%）戊二醛。要灌注固定，即选择4%多聚甲醛+（0.5-2%）戊二醛的混合固定液，这两种固定剂优缺点可以互相补充。多聚甲醛与戊二醛相比，其渗透力强、固定迅速、价格低。
2、%多聚甲醛是常用固定液，4%指的是最终的质量体积比，因此，应该是定容至1 L。如果加液1 L，40 g PFA溶入后体积稍有增加，得到的实际浓度略小于4%，但固定液的浓度要求并不是非常精确，这点浓度变化常常不会对固定效果产生影响。
3、做石蜡切片目前用的比较多的是4%的多聚甲醛或者10%的甲醛固定，做HE，IHC-P效果都是比较好的。
4、②块小：组织块体积一般在0.5-1mm3。由于固定液渗透速率缓慢，渗透深度较浅，若组织块过大，样品中心部位将得不到良好固定。对于较难一次性取的较小的组织，可适当取大一点的组织，先投入预冷的4%多聚甲醛中固定30min，随后取出切成小块，放入戊二醛固定液中继续低温固定。
5、甲醛，易挥发，且有强烈刺激气味，常用得是37％～40％得甲醛溶液，商品名为福尔马林（formalin）。用作固定的浓度习惯为10％福尔马林（即1份甲醛溶液加9份水配制而成），实际含甲醛4％ 4：戊二醛，穿透性强，微细结构保存好，但对抗原有一定影响，常与其他固定剂联合用作免疫电镜固定液。
6、如果使用甲醇和丙酮的1：1比例混合液，推荐的固定时间同样是4分钟，但为了保证更全面的固定，也可以考虑增加至20分钟。 对于4％多聚甲醛，通常推荐的固定时间为30分钟，对于某些敏感的样本，可能会延长至60分钟，以提供更强的固定效果。
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